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菲羅門Mercury系列專用液相色譜柱特別針對(duì)《中國(guó)藥典》而開(kāi)發(fā)，完美地符合藥典對(duì)于柱效、分離度、相對(duì)保留時(shí)間和對(duì)稱因子等參數(shù)的各項(xiàng)要求，并且具有良好的質(zhì)量穩(wěn)定性和高度的批間重現(xiàn)性，從而可幫助制藥企業(yè)對(duì)藥品質(zhì)量進(jìn)行有效監(jiān)控。
Mercury AA 氨基酸分析柱
特點(diǎn)：
* Mercury AA ( 氨基酸分析) 色譜柱專為分離與分析游離氨基酸而設(shè)計(jì)，以硅膠基質(zhì)反相固定相材料為填料。
* Mercury AA 固定相以高純度具有良好機(jī)械穩(wěn)定性的硅膠為基質(zhì)，采用高純度鍵合試劑，通過(guò)創(chuàng)新獨(dú)有的技術(shù)確保最大單分子層覆蓋和全封尾。
高度可控的單分子層形成和封尾技術(shù)保證了可靠的柱間重現(xiàn)性。
* Mercury AA 表面覆蓋率已達(dá)到最大化，因此具有優(yōu)異的穩(wěn)定性。
該填料為均一的球形顆粒，孔徑為120 ?，比表面積為 300 m2/g。
通過(guò)運(yùn)用獨(dú)有的勻漿填裝技術(shù)裝填得到的 Mercury AA 柱柱床密度均一穩(wěn)定，因此可保證具有最高的柱效。
通過(guò) PITC 衍生化方法，18 種氨基酸可在Mercury AA 柱獲得高分辨率的快速分析。
注意事項(xiàng)：
新的 Mercury AA 柱是置于高有機(jī)水溶液中運(yùn)輸?shù)?，在?chǔ)存和運(yùn)輸過(guò)程中，硅膠填料可能會(huì)干涸。
這時(shí)推薦用10-20 倍柱體積的純有機(jī)溶劑如甲醇、乙腈進(jìn)行沖洗以活化色譜柱。
接著可用用戶自己選擇的流動(dòng)相沖洗色譜柱。流速由0.1mL/min 逐漸升至所需的操作條件，直至基線穩(wěn)定為止。
如果柱壓和基線波動(dòng)較大，這可能是氣泡進(jìn)入了色譜柱中。
這時(shí)可用較高流速?zèng)_洗色譜柱 2-5 分鐘，例如對(duì)于 4.6x250mm 的色譜柱可采用流速1.5 mL/min。
pH 為了獲得最佳的分離效果和延長(zhǎng)柱的使用壽命，請(qǐng)盡量使用 pH 在 3 - 7.5 范圍內(nèi)的流動(dòng)相。
壓力 盡管 Mercury AA 柱可在高至 5000 psi 的壓力下使用，但正常的操作壓力應(yīng)當(dāng)?shù)陀?3000 psi。
溫度 最高操作溫度為 60℃。
儲(chǔ)藏 長(zhǎng)期不用時(shí)，保存在純有機(jī)溶劑如乙腈
供貨信息：
貨號(hào)
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描述
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規(guī)格
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包裝
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FMG-AAAA-EONU
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Mercury 5u AA
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250*4.6mm
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Ea
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氨基酸分析步驟
1. 原理
這種分析氨基酸的方法基于柱前衍生步驟，衍生化反應(yīng)是在堿性條件下完成的，采用異硫氰酸苯酯和游離氨基酸反應(yīng)生成的 PTC- 氨基酸衍生物可于 UV 254 nm 處被檢測(cè)到。
通過(guò)PITC 衍生法改善的氨基酸分離同樣使其分析更有效。
2. 試劑
三乙胺溶液： 將 1.4 mL 三乙胺和 8.6 mL 乙腈混和均勻。異硫氰酸苯酯溶液：配成 12.5 μL/mL 的異硫氰酸苯酯的乙腈溶液。
18 種氨基酸標(biāo)準(zhǔn)溶液：溶解或稀釋一定量的 18 種氨基酸于0.1 mol/L 鹽酸中， 配制成 0.5 μmol/mL18 種氨基酸標(biāo)準(zhǔn)溶液。
醋酸鈉溶液：將 16.4 g 無(wú)水醋酸鈉溶解于 2.0 L 水中，配制成0.1 mol/L 的醋酸鈉溶液，用冰醋酸調(diào)節(jié) pH到 6.5。
3. 衍生化反應(yīng)
轉(zhuǎn)移 200 μL 18 種氨基酸標(biāo)準(zhǔn)溶液（或樣品溶液）放入1.5mL 塑料管中, 加入 100 μL 三乙胺溶液和 100μL 異硫氰酸苯酯溶液，混合，至于室溫下反應(yīng) 1h 后，加入 400 μL 正己烷，渦旋振蕩 10min。
取下后用 0.45μm 濾膜過(guò)濾后進(jìn)樣。
4. 液相色譜分析
色譜柱： Mercury AA 5u 250*4.6mm （FMG-AAAA-EONU）
流速： 1.0 mL/min
溫度： 36℃
檢測(cè)： UV 254 nm
進(jìn)樣量： 5 μL
流動(dòng)相 A: 0.1 mol/L 醋酸鈉，pH 6.5 : 乙腈 = 93 : 7 (v/v)
流動(dòng)相 B: 乙腈 : 水 = 80 : 20 (v/v)
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